免费 · 免登录
PCR / qPCR 反应体系计算器（Master Mix 配制）
填单管体积、反应数和试剂盒 Master Mix 倍数（如 2× SYBR），马上得到总混液、Master Mix 用量和留给 primer、模板、水的体积，已自动多配 10% 补移液损耗。
输入
μL
×
结果
- 总混液 (×1.1)
- 220 μL
- Master Mix
- 110 μL
- Primer/模板/水
- 110 μL
公式
总混液 (μL) = 反应体积 × 反应数 × 1.1
Master Mix (μL) = 反应体积 ÷ MM倍数 × 反应数 × 1.1
提示: 已自动 ×1.1 备份 10% 移液损耗 · Master Mix 比例 = 试剂盒说明 (e.g. 2× SYBR)
这一步算对了，但整个实验有几十个参数联动。改一个稀释倍数，下游全要重算。在 Vara 里把整套实验的参数连起来，改一个自动重算全部。免费管理 3 个实验。
常见问题
为什么要多配 10%？+
多管分装时每次移液都会在枪头和管壁损失一点，混液粘度高时更明显。按反应数 × 1.1 配制，最后一管才不会不够。反应数很少（如 2 到 3 管）时，可以手动把反应数再加 1。
2× Master Mix 是什么意思，怎么算用量？+
2× 表示试剂盒预混液是 2 倍浓缩，在终体系里占一半体积。20 μL 体系每管加 10 μL Master Mix，其余 10 μL 由 primer、模板和水补足。5× 预混液则占五分之一，计算器会按倍数自动换算。
primer、模板和水的体积怎么分配？+
计算器给出的是扣掉 Master Mix 后的剩余体积。按试剂盒说明分配：qPCR 常见终浓度为每条 primer 0.2 到 0.5 μM，模板 DNA 或 cDNA 每管 1 到 2 μL，剩余用无核酸酶水补足。同一批实验里模板量保持一致。