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细胞铺板计算器(每孔细胞数与铺板密度)
填细胞计数结果和每孔要铺多少细胞(也可以按 cells/cm² 密度),选孔板和孔数,马上得到细胞悬液取量和培养基补加量。
输入
cells/mL
可写 1e6 表示 1×10⁶
每孔目标
cells
mL
结果
- 细胞总数
- 1,320,000
- 细胞悬液 (取量)
- 1.32 mL
- 培养基 (补加)
- 11.88 mL
- 总体积
- 13.20 mL
常见孔板参数
| 孔板 | 单孔面积 | 常用每孔体积 |
|---|---|---|
| 6 孔 | 9.5 cm² | 2 mL |
| 12 孔 | 3.8 cm² | 1 mL |
| 24 孔 | 1.9 cm² | 0.5 mL |
| 48 孔 | 0.95 cm² | 0.3 mL |
| 96 孔 | 0.32 cm² | 0.1 mL |
按 Corning 平底细胞培养板常用值,不同品牌略有差异,要求精确时以说明书为准。切换孔板会按整板孔数和常用体积预填。
公式
每孔细胞数 = 密度 (cells/cm²) × 单孔面积 (cm²)
悬液 (mL) = 每孔细胞数 × 孔数 × 1.1 ÷ 悬液浓度 (cells/mL)
培养基 (mL) = 每孔体积 (mL) × 孔数 × 1.1 − 悬液
提示: 不勾选多备 10% 时,公式里的 × 1.1 去掉。悬液浓度可以写成 1e6,表示 1×10⁶ cells/mL。
这一步算对了,但整个实验有几十个参数联动。改一个稀释倍数,下游全要重算。在 Vara 里把整套实验的参数连起来,改一个自动重算全部。免费管理 3 个实验。
常见问题
24 孔板每孔铺 5×10⁴ 个细胞,悬液 1×10⁶/mL,要取多少?+
铺 24 孔并多备 10%,按 26.4 孔算:细胞总数 5×10⁴ × 26.4 = 1.32×10⁶ 个,悬液 1.32×10⁶ ÷ 1×10⁶/mL = 1.32 mL。每孔 0.5 mL 时总体积 13.2 mL,再补 11.88 mL 培养基,混匀后每孔加 0.5 mL。
按密度 (cells/cm²) 铺板,怎么换算成每孔细胞数?+
每孔细胞数 = 密度 × 单孔面积。例如 96 孔板单孔约 0.32 cm²,按 1×10⁴ cells/cm² 铺,每孔就是 3200 个。换板型时按密度换算,细胞汇合度能保持一致。
各种孔板的单孔面积是多少?+
常用值:6 孔约 9.5 cm²,12 孔约 3.8 cm²,24 孔约 1.9 cm²,48 孔约 0.95 cm²,96 孔约 0.32 cm²。不同品牌略有差异,要求精确时以孔板说明书为准。
为什么要多备 10%?+
移液时管壁和枪头会挂液,最后几孔常常不够。按孔数的 1.1 倍配,能保证每孔都加足。细胞特别珍贵时可以取消勾选,按实际孔数配。
算出来的悬液比总体积还多,怎么办?+
说明悬液太稀,直接稀释已经达不到目标细胞数。先离心沉淀细胞,用较少的培养基重悬浓缩,重新计数后再算一次。
悬液浓度要用活细胞数吗?+
要用活细胞浓度。台盼蓝染色和多数自动计数仪会同时给出总细胞数和活细胞数,按活细胞算,每孔实际铺下去的有效细胞数才对得上。