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系列稀释计算器(梯度稀释每管取量与浓度)
填起始浓度、稀释倍数、做几级和每管要多少体积,马上得到每管取量、稀释液量和一张逐管浓度表。
输入
填 10 或 1:10,都按 1 份加到总共 10 份
结果
- 每管取上一管
- 100 μL
- 每管加稀释液
- 900 μL
- 起始液用量
- 100 μL
- 稀释液总量
- 4.5 mL
第 1 到 4 管转给下一管后各剩 900 μL,第 5 管剩 1 mL。
逐管配制表
| 管号 | 累计稀释 | 浓度 (mg/mL) | 取量 | 加稀释液 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 1:10 | 0.1 | 100 μL起始液 | 900 μL |
| 2 | 1:100 | 0.01 | 100 μL | 900 μL |
| 3 | 1:1,000 | 0.001 | 100 μL | 900 μL |
| 4 | 1:10,000 | 1×10⁻⁴ | 100 μL | 900 μL |
| 5 | 1:100,000 | 1×10⁻⁵ | 100 μL | 900 μL |
公式
取上一管 (mL) = 每管终体积 ÷ 稀释因子
加稀释液 (mL) = 每管终体积 − 取上一管
第 k 管浓度 = 起始浓度 ÷ 稀释因子^k
提示: 1:10 按 1 份加到总共 10 份计算(稀释因子 10)。勾选每管预留 10% 时,终体积先乘 1.1。除最后一管外,每管转给下一管后会少一个取量。
这一步算对了,但整个实验有几十个参数联动。改一个稀释倍数,下游全要重算。在 Vara 里把整套实验的参数连起来,改一个自动重算全部。免费管理 3 个实验。
常见问题
10 倍系列稀释做 5 级,每管 1 mL 怎么配?+
每管取上一管 1 mL ÷ 10 = 100 μL,加稀释液 1 mL − 100 μL = 900 μL。先在 5 支管里各加 900 μL 稀释液,从起始液取 100 μL 加入第 1 管混匀,再从第 1 管取 100 μL 加入第 2 管,依次做到第 5 管。第 5 管浓度是起始液的 1/10⁵ (1:100,000)。第 1 到 4 管转出后各剩 900 μL,第 5 管剩 1 mL,要求各管等体积时从第 5 管弃去 100 μL。
1:10 是 1 份加 10 份,还是 1 份加到 10 份?+
本页按 1 份样品加到总共 10 份计算,也就是稀释因子 10:1 份样品加 9 份稀释液。有的说明书把 1:10 写成 1 份样品加 10 份稀释液,实际是 11 倍稀释,这时在稀释因子里填 11。拿不准就看说明书给的体积:100 μL 加 900 μL 是 10 倍,100 μL 加 1 mL 是 11 倍。
2 倍梯度稀释做标准曲线,起始 1000 ng/mL,8 个点每管 100 μL 怎么配?+
每管取上一管 100 μL ÷ 2 = 50 μL,加 50 μL 稀释液。8 管浓度依次为 500、250、125、62.5、31.25、15.63、7.813、3.906 ng/mL。如果起始液本身也作为标准曲线的最高点,把它单独留出来,不算在 8 级里。
勾选「每管预留 10%」是什么意思?+
勾选后每管按终体积的 1.1 倍配,给枪头和管壁挂液留余量。以 10 倍稀释、每管 1 mL 为例,变成取 110 μL、加 990 μL,混匀后 1.1 mL,转出 110 μL 后还剩 990 μL,接近 1 mL 的用量。
稀释倍数很大时取量太小,怎么办?+
取量小于 1 μL 时移液误差很大。例如每管 100 μL 做 1:1000 稀释,取量只有 0.1 μL。可以加大每管终体积,或者把一级 1:1000 拆成三级 1:10,每级取 10 μL 加 90 μL,最终浓度一样。
每管浓度怎么算?涂板计数时选哪一管?+
第 k 管浓度 = 起始浓度 ÷ 稀释因子的 k 次方。例如起始 1×10⁸ CFU/mL 做 10 倍稀释,第 5 管是 1×10⁸ ÷ 10⁵ = 1000 CFU/mL,取 100 μL 涂板约长 100 个菌落,落在常用的 30 到 300 个可计数范围内。